El Desafío Doñana es una carrera de resistencia de larga distancia. Es una prueba única que viene determinada por el diferente orden y la distancia de las disciplinas. Primero ciclismo, 100 km, segundo natación, individual 1 km, y por equipos 2,8 km, y tercero la carrera a pie, 30 km. El recorrido se desarrolla por entornos naturales y parajes de una belleza única como la desembocadura del Guadalquivir y el Parque Natural de Doñana.